HuGen线粒体全基因组测序试剂盒锚定国际标准，破解法医难题！

国际法医遗传学学会（ISFG）DNA委员会发布的《线粒体DNA分型修订及扩展指南》，是全球法医mtDNA检测领域的 “金标准”—— ISFG指南围绕mtDNA检测的全流程，重点讨论了异质性、数据质量控制、数据库检索与统计评估等关键问题，并提出了具体建议，以确保 mtDNA 分型结果在法医案件中的可靠性与证据效力。

mtDNA控制区（CR）包含绝大多数与法医环境中单倍型区分相关的快速进化位点，传统方案针对CR的高变区片段（HVS-I：16024–16365、HVS-II：73–340、HVS-III：340–576）进行检测，但在法医案件中，仅靶向HVS-I/II数据会限制mtDNA 检测的能力；鉴于完整CR对案件工作与群体数据库应用的价值，建议尽可能生成完整CR数据。此外，该领域可能会朝着使用 “下一代”或“大规模并行” 测序方法发展，建议开发至少针对完整CR的方案。

指南明确，异质性（点异质性PHP与长度异质性LHP）是mtDNA检测的核心关注点之一。在单个样本中，PHP常表现为单一位点的混合碱基信号，LHP则多出现于多聚核苷酸区域（如HVS-I的16189位多聚C、HVS-II的302-310位多聚C），二者的误判或遗漏，可能直接影响鉴定结论的准确性。

对mtDNA数据库检索提出明确标准：需覆盖完整数据库，忽略高变多聚片段（如16189位、310位附近多聚C）的长度变异，同时采用保守的统计方法评估匹配显著性。此外，当核DNA检测效果不佳时，需支持mtDNA与常染色体STR结果的联合分析，提升证据效力。

在用于法医数据库构建的群体遗传学研究中，应对mtDNA的整个控制区进行测序。

对于两种其他方面完全一致的单倍型，即便在点异质性和长度异质性上存在差异，这些差异也不能作为排除它们源自同一来源或相同母系谱系的证据。

在进行检索时，需针对所有可用序列的完整数据库，结合测序（解读）范围开展检索，以避免查询结果出现偏差。

在估算（mtDNA单倍型）频率而进行数据库检索时，应忽略同源多聚片段中的长度变异等变异度极高的位点。对于异质性标注，检索方式需确保不排除任何一种异质性变异类型。

针对指南 “全序列分析” 的核心诉求，HuGen线粒体全基因组测序试剂盒采用创新叠瓦式扩增技术，通过2个引物池共131个扩增子，实现人类mtDNA全基因组（16569bp）的完整覆盖 —— 既包含10个高变区扩增子（覆盖HVS-I、HVS-II 等关键区域），也囊括121个编码区扩增子，一次性获取高变区与保守区的全部突变信息。

依托二代测序的高通量优势，该试剂盒可精准捕捉单一位点的混合碱基信号，即便样本中存在低比例异质性（如1%以下的突变型），也能被清晰识别。同时，试剂盒配套的分析软件严格遵循IUPAC命名规范标注混合碱基，支持正反向测序结果交叉验证，匹配指南对PHP、LHP的解读标准。

法医实践中，陈旧骨骼、火灾遇难者遗骸等高度降解样本，常因DNA片段短、浓度低导致核DNA检测失效。HuGen线粒体全基因组测序试剂盒针对性优化扩增子设计，将大部分扩增子长度控制在200bp以内，可高效扩增降解样本中的短片段mtDNA，打破 “样本差 = 检测难” 的困境。实验数据更印证其硬核性能：从10pg到5ng的不同起始模板量（覆盖法医常见样本浓度范围），试剂盒均实现100%突变检出率。

安科华捷构建了 “样本 - 文库 - 测序 - 分析” 全流程自动化解决方案：适配国产化高通量自动化建库工作站，实现文库制备的标准化操作，减少人工干预与样本损耗；搭配专业二代测序仪与高精度分析软件，可自动完成序列比对、突变检测等分析，大幅缩短实验周期。

从陈旧骨骼的个体识别，到复杂母系亲缘的认定，再到大规模遇难者的身份匹配，HuGen线粒体全基因组测序试剂盒始终以 “精准、高效、合规” 为核心，将ISFG 指南的要求转化为实实在在的检测能力，为司法机关破解疑难案件提供关键技术支撑，让每一份证据都经得起科学检验，让每一次鉴定都守护司法公正。